國立屏東科技大學
專利名稱
一種體外載脂巨噬細胞模型之建置方法
專利證號
I857410
專利國別
中華民國
發明人代表
張格東
專利技術摘要
本發明提供一種體外載脂巨噬細胞模型之建置方法，其特徵係包含：一初步培養步驟：以含有胎牛血清及巨噬細胞集落刺激因子之培養液培養單核球細胞，得到巨噬細胞；一巨噬細胞集落刺激因子移除步驟：初步培養步驟後，以不含巨噬細胞集落刺激因子之培養液培養該巨噬細胞；以及一免疫反應誘發步驟：以介白素-4（IL-4）培養經該巨噬細胞集落刺激因子移除步驟後之該巨噬細胞，得到載脂巨噬細胞。藉此，本發明可用於研究多種疾病，例如多發性硬化症、包含乳突腎細胞癌、食道黃色素瘤、非小細胞肺癌等多種癌症，以及其他與載脂巨噬細胞相關之疾病，並可進一步作為藥物篩選平台。
可應用範圍
(產業利用性)
1.一種載脂巨噬細胞模型之建置方法，其特徵係包含：一初步培養步驟：以含有胎牛血清及巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)之培養液培養單核球細胞，得到巨噬細胞；一巨噬細胞集落刺激因子移除步驟：於該初步培養步驟後，以不含巨噬細胞集落刺激因子之培養液培養該巨噬細胞7~21天；以及一免疫反應誘發步驟：以含介白素-4(IL-4)之培養液培養經該巨噬細胞集落刺激因子移除步驟後之該巨噬細胞，得到載脂巨噬細胞；該不含巨噬細胞集落刺激因子之培養液，成分與初步培養步驟之培養液相同，但不包含巨噬細胞集落刺激因子及介白素-4(IL-4)；該含介白素-4(IL-4)之培養液，成分與初步培養步驟之培養液相同，但不包含巨噬細胞集落刺激因子，並進一步包含介白素-4(IL-4)。
2.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，該單核球細胞係源自C57BL/6小鼠股骨及脛骨髓腔之骨髓來源單核球細胞。
3.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，該胎牛血清佔該培養液整體之含量為8~15v/v%。
4.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，該初步培養步驟持續5~10天。
5.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，於該初步培養步驟中，該巨噬細胞集落刺激因子於該培養液之濃度為30~100ng/mL。
6.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，於該免疫反應誘發步驟中，該介白素-4之濃度為5~20ng/mL。
7.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，該免疫反應誘發步驟持續12~36小時。
8.如請求項1所述之載脂巨噬細胞模型之建置方法，其中，於該巨噬細胞集落刺激因子移除步驟中，每2~3天更換一次培養液。
照片/圖示
